实验动物微生物学等级及监测

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实验动物微生物学等级及监测

发布日期：2016-08-27 发布人员：系统管理员

GB 14922.2-2001

前言（摘）

本标准的全部技术内容为强制性。

本标准是在GBl4922—1994《实验动物微生物学和寄生虫学监测等级(啮齿类和兔类)》的基础上，与寄生虫学监测等级的有关内容分开，形成的独立标准。

本标准对实验动物等级进行了重新设定，与寄生虫学等级对应，将实验小鼠和大鼠的微生物学等级分为清洁级、无特定病原体级(SPF)和无菌级，取消了普通级。脉鼠、地鼠和兔仍保留四级。犬和猴分为普通级和SPF级。相应增加了犬和猴的微生物学监测项目。

本标准对取样数量作了重新规定。根据生产繁殖单元大小决定取样数量，改变了过去按动物等级取样的做法。兔、犬、猴等较大动物可以活体采样，不必处死动物，因此取样数量也没有减少。

本标准对必须检测和必要时检测作了限定性说明：“必须检测项目：是指在进行实验动物质量评价时必须检测的项目。必要时检测项目：是指从国外引进实验动物、怀疑有本病流行、申请实验动物生产许可证和实验动物质量合格证时必须检测的项目”。

本标准从3个方面对监测项目进行了调整：删除原标准列出、但实际检出率极低或很少检出的项目(如：实验小鼠、大鼠不检测多杀巴斯德杆菌)；增加近年来在动物生产中出现的一些病原微生物(如：念珠状链杆菌)。同时，对不同等级动物的个别监测项目进行了调整(如：嗜肺巴斯德杆菌由清洁级调为SPF级必须检测项目)，使不同动物各等级检测项目更加合理。

1 范围

本标准规定了实验动物微生物学等级及监测，包括：实验动物微生物学的等级分类、检测要求、检测程序、检测规则、结果判定和报告等。

本标准适用于豚鼠、地鼠、免、犬和猴；清洁级及以上小鼠、大鼠。

2 引用标准

下列标准所包含的条文，通过在本标准中引用而构成为本标准的条文。本标准出版时，所示版本均为有效。所有标准都会被修订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新版本的可能性。

GB/T 14926.1～14926.64—2001 实验动物微生物学检测方法

3 实验动物微生物学等级分类

3.1 普通级动物 conventional(CV)animal

不携带所规定的人兽共患病病原和动物烈性传染病的病原。

3.2 清洁动物 clean(CL)animal

除普通动物应排除的病原外，不携带对动物危害大和对科学研究干扰大的病原。

3.3无特定病原体动物 specific pathogen free (SPF)animal

除清洁动物应排除的病原外，不携带主要潜在感染或条件致病和对科学实验干扰大的病原。

3.4无菌动物 germ free (GF)animal

无可检出的一切生命体。

4 检测要求

4.1 外观指标

动物应外观健康、无异常。

4.2 病原菌指标

病原菌指标见表1、表2和表3。

4.3 病毒指标

病毒指标见表4、表5和表6。

表1 小鼠、大鼠病原菌检测项目

动物等级			病原菌	动物种类
动物等级			病原菌	小鼠	大鼠
无菌动物	无特定病原体动物	清洁动物	沙门菌 Salmonella spp.	●	●
			单核细胞增生性李斯特杆菌 Listeria monocytogenes	○	○
			假结核耶尔森菌 Yersinia pseudotuberculosis	○	○
			小肠结肠炎耶尔森菌 Yesinia enterocolitica	○	○
			皮肤病原真菌 Pathogenic dermal fungi	○	○
			念珠状链杆菌 Streptobacillus moniliformis	○	○
			支气管鲍特杆菌 Bordetella bronchiseptica		●
			支原体 Mycoplasma spp.	●	●
			鼠棒状杆菌 Corynebacterium kutscheri	●	●
			泰泽病原体 Tyzzer’s organism	●	●
			大肠埃希菌0115 a,C,K(B)Escherichia coli 0115 a,C,K(B)	○
			嗜肺巴斯德杆菌 Pasteurella pneumotropica	●	●
			肺炎克雷伯杆菌 Klebsiella pneumoniae	●	●
			金黄色葡萄菌 Staphylococcus aureus	●	●
			肺炎链球菌 Streptococcus pnemoniae	○	○
			乙型溶血性链球菌 β-hemolyticstreptococcus	○	○
			绿脓杆菌 Pseudomonas aeruginosa	●	●
			无任何可查到的细菌	●	●
注：●必须检测项目，要求阴性；○必要时检查项目，要求阴性。

表2 豚鼠、地鼠、兔病原菌检测项目

动物等级				病原菌	动物种类
动物等级				病原菌	豚鼠	地鼠	兔
无菌动物	无特定病原体动物	清洁动物	普通级动物	沙门菌 salmonella spp.	●	●	●
				单核细胞增生性李斯特杆菌 Listeria monocytogenes	○	○	○
				假结核耶尔森菌 Yersinia pseudotuberculosis	○	○	○
				小肠结肠炎耶尔森菌 Yesinia enterocolitica	○	○	○
				皮肤病原真菌 Pathogenic dermal fungi	○	○	○
				念珠状链杆菌 Streptobacillus moniliformis	○	○
				多杀巴斯德杆菌 Pasteurella multocida	●	●	●
				支气管鲍特杆菌 Bordetella bronchiseptica	●	●
				泰泽病原体 Tyzzer's organism	●	●	●
				嗜肺巴斯德杆菌 Pasteurella pneumotropica	●	●	●
				肺炎克雷伯杆菌 Klebsiella pneumoniae	●	●	●
				金黄色葡萄球菌 Staphylococcus aureus	●	●	●
				肺炎链球菌 Streptococcus pnemoniae	○	○	○
				乙型溶血性链球菌 β-hemolyticstreptococcus	●	○	○
				绿脓杆菌 Pseudomonas aeruginosa	●	●	●
				无任何可查到的细菌	●	●	●
注：●必须检测项目，要求阴性；○必要时检查项目，要求阴性。

表3 犬、猴病原菌检测项目

动物等级		病原菌	动物种类
			犬	猴
无特定病原体动物	普通级动物	沙门菌 salmonella spp.	●		●
		皮肤病原真菌 Pathogenic dermal fungi	●		●
		布鲁杆菌 Brucella spp.	●
		钩端螺旋体 Leptospira spp.	△
		志贺菌 Shigella spp.			●
		结核分枝杆菌 Mycobacterium tuberculosis			●
		钩端螺旋体 ^1） Leptospira spp.	●
		小肠结肠炎耶尔森菌 Yesinia enterocolitica	○		○
		空肠弯曲杆菌 Campylobaceter jejuni	○		○
注：●必须检测项目，要求阴性。○必要时检测项目，要求阴性。△必要时检测项目，可以免疫。 1）不能免疫，要求阴性。
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表4 小鼠、大鼠病毒检测项目

动物等级			病毒	动物种类
				小鼠	大鼠
无菌动物	无特定病原体动物	清洁动物	淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒 Lymphocytic Choriomeningitis Virus(LCMV)	○
			汉坦病毒 Hantavirus(HV)	○		●
			鼠痘病毒 Ectromelia Virus(Ect.)	●
			小鼠肝炎病毒 Mouse Hepatitis Virus(MHV)	●
			仙台病毒 Sendai Virus(SV)	●		●
			小鼠肺炎病毒 Pneumonia Virus of Mice (PVM)	●		●
			呼肠孤病毒Ⅲ型 Reovirus type Ⅲ(Reo-3)	●		●
			小鼠细小病毒 Minute Virus of Mice(MVM)	●
			小鼠脑脊髓炎病毒 Theiler’s Mouse Encephalomyelitis Virus(TMEV)	○
			小鼠腺病毒 Mouse Adenovirus(Mad)	○
			多瘤病毒 Polyoma Virus(POLY)	○
			大鼠细小病毒RV株 Rat Parvovirus(KRV)			●
			大鼠细小病毒H-1株 Rat Parvovirus(H-1)			●
			大鼠冠状病毒/大鼠涎泪腺炎病毒 Rat Coronavirus (RCV)/Sialodacryoadenitis Virus(SDAV)			●
			无任何可查到的病毒	●		●
注：●必须检测项目，要求阴性；○必要时检查项目，要求阴性。
？	？	？	？	？	？	？

表5 豚鼠、地鼠、兔病毒检测项目

动物等级				病毒	动物种类
动物等级				病毒	豚鼠	地鼠	兔
无菌动物	无特定病原体动物	清洁动物	普通级动物	淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒 Lymphocytic Choriomeningitis Virus(LCMV)	●	●
			普通级动物	兔出血症病毒 Rabbit Hemorrhagic Disease Virus(RHDV)			▲
				仙台病毒 Sendai Virus(SV)	●	●
				兔出血症病毒 ^1） Rabbit Hemorrhagic Disease Virus (RHDV)			●
				仙台病毒 Sendai Virus(SV)			●
				小鼠肺炎病毒 Pneumonia Virus of Mice (PVM)	●	●
				呼肠孤病毒Ⅲ型 Reovirus type Ⅲ(Reo-3)	●	●
				轮状病毒 Rotavirus (RRV)			●
				无任何可查到的病毒	●	●	●
注：●必须检测项目，要求阴性。▲必要时检测项目，可以免疫。 1）不能免疫，要求阴性。

表6 犬、猴病毒检测项目

动物等级		病毒	动物种类
动物等级		病毒	犬	猴
无特定病原体动物	普通级动物	狂犬病病毒 Rabies Virus(RV)	▲
		犬细小病毒 Canine Parvovirus(CPV)	▲
		犬瘟热病毒 Canine Distemper Virus(CDV)	▲
		传染性犬肚炎病毒 Infectious Cercopithecine Herpesvirus Type 1 Type 1(BV)	▲
		猕猴疱疹病毒1型（B病毒）Cercopithecine Herpesvirus Type1(BV)		●
		猴逆转D型病毒 Simian Retrovirus D(SRV)		●
		猴免疫缺陷病毒 Simian Immunodeficiency Virus(SIV)		●
		猴猴T细胞趋向性病毒I型 Simian T Lymphotropic Virus Type 1(STLV-1)		●
		猴痘病毒 Simian Pox Virus(SPV)		●
		上述4种犬病毒不免疫	●
注：●必须检测项目，要求阴性。▲必须检测项目，要求免疫。

5 检测程序

5.1 检测的动物应当日按细菌、真菌、病毒要求联合取样检查。

5.2 检测程序：

6 检测方法

按GB/T 14926.1～14926.64-2001中的规定分项进行.

7 检测规则

7.1 检测频率

7.1.1 普通级动物:每三个月至少检测动物一次;

7.1.2 清洁动物:每三个月至少检测动物一次;

7.1.3 无特定病原体动物:每三个月至少检测动物一次;

7.1.4 无菌动物:每年检测动物一次.每2～4周检查一次动物的生活环境标本和粪便标本.

7.2 取样要求

7.2.1 选择成年动物用于检测。

7.2.2 取样数量:每个小鼠、大鼠、地鼠、豚鼠和兔生产繁殖单元；以及每个犬、猴生产繁殖群体，根据动物多少，取样数量见表7。

表7 实验动物不同生产繁殖单元取样数量

群体大小，只	取样数量 ^1）
＜100 100～500 ＞500	不少于5只不少于10只不少于20只
1）每个隔离器检测2只。

7.3 取样、送检

7.3.1 应在每一生产繁殖单元的不同方位(例如:四角和中央)选取动物。

7.3.2 动物送检容器应按动物级别要求编号和标志,包装好,安全送达实验室,并附送检单,写明动物品种品系、级别、数量和检测项目。

7.3.3 无特殊要求时,兔、犬和猴和活体取样，可在生产繁殖单元进行。

7.4 检测项目的分类

7.4.1 必须检测项目：是指在进行实验动物质量评价时必须检测的项目。

7.4.2 必要时检测项目：是指从国外引进实验动物时；怀疑有本病流行时；申请实验动物生产许可证和实验动物质量合格证时必须检测的项目。

8 结果判定

在检测的各等级动物中，如有一只动物的一项指标不符合该等级标准要求，则判为不符合该等级标准。

9 报告

报告应包括检测结果、检验结论等项内容。